服务介绍
RNA作为生物体内的遗传信息载体，根据结构和功能的不同分为信使RNA（Messenger RNA，mRNA）和非编码（Non-coding RNA，ncRNA），在基因调控层面，这些RNA分子起到了至关重要的作用。
安邦生物研发的第五代RNA过表达载体可对mRNA/lncRNA/circRNA分子实现精准表达，能满足普通真核表达、慢病毒包装和腺相关病毒（AAV）包装等多种用途。其中circRNA载体均携带优化过的侧翼成环框架，含有精心改造的Alu元件、QKI等RBP的结合位点，并使用全新设计的环化介导序列，使插入的circRNA准确高效环化，mRNA及lncRNA表达载体携带强启动子及KOZAK序列，使mRNA/lncRNA精准正确表达。
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过表达分子类型 |
载体名称 |
抗性 |
荧光标记 |
应用 |
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瞬转细胞 |
包装慢病毒 |
包装腺相关AAV病毒 |
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circRNA |
pCD5-ciR |
AmpR |
无 |
√ |
× |
× |
|
pCD25-ciR |
AmpR |
eGFP |
√ |
× |
× |
|
|
pLO5-ciR |
AmpR/PuroR |
无 |
√ |
√ |
× |
|
|
pLC5-ciR |
AmpR/PuroR |
eGFP |
√ |
√ |
× |
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pK5ssAAV-ciR |
AmpR |
无 |
√ |
× |
√ |
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pK25ssAAV-ciR |
AmpR |
eGFP |
√ |
× |
√ |
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mRNA&lncRNA |
pCDNA3.1 |
AmpR |
无 |
√ |
× |
× |
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pCDH |
AmpR |
eGFP |
√ |
√ |
× |
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ssAAV.CMV.EGFP.WPREs |
AmpR |
eGFP |
√ |
× |
√ |
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技术优势
1. 过表达效率高；
2. 特异性强、准确率高：优化筛选过的表达元件有效保证目标RNA分子的序列准确表达；
3. 稳定性高：mRNA、lncRNA（100-3000nt序列）；circRNA（200-2500nt序列）均能实现准确高效过表达；
4. 适用范围广：可用于细胞转染、包装慢病毒或腺相关病毒，同时可提供GFP绿色荧光蛋白标记和嘌呤霉素抗性基因标记，适用于客户不同的实验需求。
服务流程
1. 载体构建；
2. 瞬时转染；
3. 特异性引物设计合成；
4. RT-qPCR验证；
5. Sanger测序验证；
6. 病毒包装（可选，列于病毒包装项目）
客户提供
1. 基因ID/物种/全长序列
2. 载体名称
我们提供
1. 目的载体：10μg质粒+200μL甘油菌/对照载体：10μg质粒+200μL甘油菌；
2. 载体构建与验证实验报告：
① 载体构建步骤；
② 载体测序验证结果原始文件；
③ 细胞转染实验步骤；
④ qPCR实验流程方案及产物测序；
⑤ 载体构建与验证实验报告。
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