人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells, HUVECs)是一种广泛应用于血管生物学研究中的细胞模型。这些细胞可以从新生儿脐带中的静脉分离获得。相较于成人的静脉或动脉内皮细胞,HUVECs被优选用于实验室研究的主要原因是它们具有干细胞的潜能,理论上可以进行50-60次传代。小优今天要给大家介绍的是HUVEC细胞特性、如何培养。
HUVEC细胞特点
1细胞形态
内皮细胞样,贴壁生长,鹅卵石状外观,具有大的深色细胞核;在增殖期间,细胞小且大小均匀。
HUVEC细胞形态,显微镜(40X)[1]
2完全培养基
可选择基础培养基+血清的培养体系或者成品完全培养基。
①基础培养基+血清
这种完全培养基一般血清的含量是20%,基础培养基的类型可以是TC199(含有多种维生素、无机盐和微量元素等)、M199(含有独特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黄嘌呤、胸腺嘧啶等)或者RPMI-1640(平衡盐溶液BSS+21种氨基酸+11种维生素),关于基础培养基的更详细的内容,感兴趣的老师可以查看《细胞培养常见问题之经典液体培养基篇》。除此之外,也可以再添加相关的细胞营养添加剂或非营养添加剂以补充细胞所需的额外营养或维持细胞培养体系的稳定,必要的时候也可以加入一些抗生素来预防细胞的污染。比如:
ECGF:内皮细胞生长因子,可以显著提高HUVEC细胞周期中的S期细胞数量,促进细胞DNA合成,从而加速细胞的增殖速度;ECGF还能保持HUVEC细胞的正常生理功能,如血管生成能力。
L-glutamine:在细胞培养中,尤其当细胞快速分裂时,L-谷氨酰胺可作为一种辅助能源。
Heparin:肝素可以与某些生长因子结合,增加其稳定性,并促进细胞生长。
HEPES:HEPES对细胞没有营养价值,但是当需要在CO2培养箱外长时间处理细胞培养物时,添加HEPES可提供额外的PH缓冲能力。
Anti-PPLO agent:针对支原体(Mycoplasma)的一种抗菌剂。
Amphotericin: 两性霉素在细胞培养中主要用于防止真菌污染。