血样来源
Whole blood全血样本
Buffy coat（血液样本中除去红细胞和血浆后含有白细胞的部分）
LRSC（Leukocyte reduction system chambers）
cord blood脐带血
bone marrow 骨髓样本
Leukopak®白细胞单采术
1红细胞、PBMC、淋巴细胞的占比、绝对计数
2不同血样中的不同淋巴细胞占比
二常见的两种血样处理方式：裂红 & PBMC
1裂红workflow
进入流式专家公众号---流式装备包---外周血样本制备，可以查看详细操作视频
2血量&孵育时间推荐
3裂红结果判断
a.裂红后，样本清澈
b.流式上机分群清晰
三裂红处理常见问题
外周血中常见的免疫细胞检测指标
其中T细胞的分群使用了较多的趋化因子受体指标
Naive：CD197+CD45RA+
TE:CD197-CD45RA+
TcM: CD197+CD45RA-
TeM: CD197-CD45RA-
TH1: CD183+CD196-
TH2: CD183-CD196-
TH17:CD183-CD196+
CD197=CCR7,CD183=CXCR3, CD196=CCR6 为趋化因子受体
1通过流式检测趋化因子受体表达的灵敏度
全血样本直接染色或处理得到PBMCs用于染色。文章比较了9种不同的处理方案，以确认哪种方案可以最大限度地检测趋化因子受体。
(...) Indicates protocol that gave greatest sensitivity;
(++) loss of 1-24% sensitivity;
(+) loss of 25-39% sensitivity;
(-) loss of more than 40%.
各位小伙伴，你选对样本处理方案了吗？
最佳的处理方式推荐使用Ficoll（#abs930-200ml）哦~
2先裂红还是先染色？
a.红细胞裂解-洗涤-流式染色-洗涤(LWSW)法
减少碎片量，获得更好的信噪比
洗两次细胞损失多一点
b.流式染色-红细胞裂解-洗涤(SLW)法
少离心一次，减少一定的细胞损失
与细胞粘附相关的指标不适用
c.两个不同的处理染色结果是否有差异？--细胞碎片
比较了SLW和LWSW评估的104种抗体的表达，以确定两种方法之间的差异。
比较了两种方法制备的阳性细胞百分比和MFI，尽管SLW的染色指数和信噪比显著高于LWSW样品，但阳性细胞百分比和MFI均无显著差异。
d.两个不同的处理染色结果是否有差异？---MFI信号差异
e.104种细胞表面抗原表达，以确定两种方法之间的差异
