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1,4-二硫苏糖醇通常作为Cleland试剂而被人们所熟知。它可保护硫醇基团并还原肽和蛋白中的二硫键。它可将二硫键还原成巯基,并通常用于受体研究以确定二硫键在受体占据和功能性中的功能重要性。它还让单硫醇完全保持还原状态。
应用
1,4-二硫苏糖醇可用于:
- 1)蛋白和酶的分离、纯化和表征
- 2)酶活的测量(酶的重激活)
- 3)测定蛋白和酶中的二硫基团
- 4)扩增前的DNA提取
用于将 −SH 基保持在还原态的绝佳试剂;定量还原二硫化物。在 SDS-PAGE 前,DTT 在样品缓冲液中可有效还原蛋白二硫键。DTT 还可用于还原交联剂 N,N′-双(丙烯酰)胱胺的二硫键桥以分解聚丙烯酰胺凝胶基质。DTT 的刺激性和毒性都低于 2-巯基乙醇。通常,使用 DTT (100mM) 所需的浓度是使用 2-巯基乙醇 (5% v/v, 700mM) 的浓度的七分之一。 |